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游离脂肪酸含量试剂盒操作说明!


发布日期:[2019/12/24 11:03:02] 共阅[73]次
游离脂肪酸含量试剂盒操作说明!


产品内容:
提取液:液体 100 mL×1 瓶,室温保存。
试剂一:自备。实验前一天,取一个玻璃瓶,按照正庚烷:无水甲醇:氯仿=24:1:25 的比例配置(自备),盖紧后混匀,室温保存。
试剂二:液体 6 mL×1 瓶,室温保存。
试剂三:粉剂×2 瓶,4℃保存。临用前在试剂瓶中加入 13mL 无水乙醇,充分溶解,4℃可保存一周。
标准品:粉剂×1 瓶,10mg 棕榈酸,室温保存。临用前把试剂转移到 10 mL 玻璃瓶中,加入 7.8mL 氯仿充分溶解,即为 5μmol/mL 的棕榈酸标准溶液。


产品说明:
FFA 既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。血清中 FFA 的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关。FFA 与铜离子结合形成脂肪酸铜盐,并溶于氯仿;利用铜试剂法测定铜离子含量,即可推算出游离脂肪酸含量。


自备、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、一个 25 mL 玻璃瓶、一个 15mL 玻璃瓶、正庚烷、无水甲醇、氯仿(三氯甲烷)、无水乙醇和蒸馏水。


操作步骤:

一、样品中 FFA 提取:
1、血清中 FFA 测定:将所取血液,室温静置 1 h 后,于 4 ℃ 离心机 3500 rpm 离心 15min,取上层血清置于-20℃冰箱保存,待测
2、组织中 FFA 含量测定:组织用生理盐水冲洗干净后,用吸水纸吸取表面水分,称取约 0.1g,加入 1 mL 提取液,匀浆后,8000rpm,4℃离心 10min,取上清液,置冰上待测。

二、测定:
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上,调节波长到 550 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在 37℃水浴中预热 30 min 以上。
3. 标准品的稀释:将标准品稀释成 1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL。


游离脂肪酸含量试剂盒操作说明!

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